windows-1251glava 3.2.3
3.2.3. Переохлаждение
В результате острого переохлаждения (табл. 5, рис. 12), через 2 часа с момента окончания воздействия низкой температуры, снижается активность АДГ (77.9%, p<0.01), АльДГ (41.1%, p<0.001), каталазы-Н
2О2 (78.3%, p<0.05), но в 1.9 раза возрастает
Рисунок 12. Активность ферментов катаболизма этанола и соотношение АДГ/АльДГ в печени через 2 часа после переохлаждения и в условиях дополнительной алкоголизации (%, по отношению к контролю)
Примечания - см. рис. 8
соотношение АДГ/АльДГ (p<0.001). А при дополнительной алкоголизации изменения со стороны АДГ и АльДГ и их соотношения не обнаруживаются, но, по сравнению с показателями у интактных животных, существенно повышается активность каталазы в отношении Н
2О2 (158.1%, p<0.01) и этанола (148.8%, p<0.01), а также активность ксантиноксидазы (134.7%, p<0.05). Достоверных различий по активности исследуемых ферментов между алкоголизи-
Рисунок 13. Активность ферментов катаболизма этанола и соотношение АДГ/АльДГ в печени 24 часа после переохлаждения и при дополнительной алкоголизации (%, по отношению к контролю)
Примечания - см. рис. 8.
рованными крысами и испытавшими совместное действии этанола и стресса на этом сроке исследования не выявляется
На суточном сроке после ПО (табл. 5, рис. 13) регистрируется повышение активности АльДГ (138.5%, p<0.001) и восстановление - АДГ, что к приводит снижению соотношения АДГ/АльДГ на 45.9%(p<0.01). При этом, остается низкой активность каталазы-Н
2О2 (78.9%, p<0.05) и уменьшается активность ксантиноксидазы (70.9%, p<0.02) по отношению к соответствующим показателям в группе интактных крыс.
В отличие от переохлаждения без дополнительной алкогольной интоксикации, при совместном действии стресс-фактора и алкоголя различия с активностью ферментов печени интактных животных не обнаруживаются.
Т
аблица 5. Активность ферментов катаболизма этанола в печени животных, подвергавшихся переохлаждению (ПО) и алкогольной интоксикации
Группы животных
КОНТРОЛЬ
AЛКОГОЛЬ (А)
ПО - 2 часа
+ А
ПО - 24 часа
+ А
АДГ
(нмоль/мин*мг)
11.8 ± 0.4 (n=25)
9.9 ± 0.6 (n=18) *
9.2 ± 1.2 (n=8) *
12.1 ± 1.4 (n=7)
10.4 ± 1.0 (n=8)
12.8 ± 2.4(n=7)
АльДГ (нмоль/мин*мг)
2.65 ± 0.09 (n=24)
2.92 ± 0.13 (n=15)
1.09 ± 0.17 (n=8) +
3.16 ± 0.42 (n=7)
3.67 ± 0.48 (n=7) +
2.43 ± 0.20 (n=7)
КАТ - Э (нмоль/мин*мг)
78.6 ± 7.4 (n=20)
121.5 ± 7.7 (n=15) +
100.9 ± 9.2 (n=8)
117.3 ± 10.0 (n=7) *
66.9 ± 4.9 (n=8) *
62.2 ± 7.5 (n=7) [*]
КАТ - Н2О2 (мкмоль/мин*мг)
34.6 ± 1.8 (n=20)
54.3 ± 4.2 (n=20) +
27.1 ± 3.1 (n=7) ^
54.7 ± 7.4 (n=7) *
27.3 ± 1.4 (n=8) ^
38.2 ± 3.1 (n=7) [*]
КО
(нмоль/мин*мг)
1.93 ± 0.15 (n=20)
2.01 ± 0.12 (n=14)
2.83 ± 0.47(n=7)
2.6 ± 0.3 (n=7) ^
1.37 ± 0.14 (n=7) ^
2.17 ± 0.25 (n=6)
Примечания - см. табл. 3.
Однако, в этих условиях, соотношение АДГ/АльДГ на 67.3% (p<0.05) выше, а пероксидазная активность каталазы и активность каталазы-Н
2О2 ниже (на 48.8%, p<0.01 и на 29.7%, p<0.01; соответственно), чем у животных, алкоголизированных без предварительного ПО.
Повышению величины АДГ/АльДГ соотношения к 90-й минуте алкоголизации после ПО в определенной степени соответствует интолерантность к гипотермическому эффекту этанола (рис. 14). Но достоверная линейная корреляция в этой ситуации не обнаруживается, вместе с тем, значение коэффициента нелинейной корреляции (h =0.6765, p<0.02) указывает на то, что связь функционального характера все же имеется.
Рисунок 14. Изменение соотношения АДГ/АльДГ в печени на 90-й минуте алкогольной интоксикации у крыс, испытавших переохлаждение, по сравнению с интактными животными (D А/А) и гипотермический эффект этанола (D t° C)
Характерным признаком алкогольной интоксикации через сутки после переохлаждения явилась и более низкая способность каталазы к окислению этанола, сочетающаяся со снижением активности каталазы-Н
2О2 по сравнению с показателями у крыс, алкоголизированных без предварительного ПО, что может отражать снижение роли каталазного пути окисления этанола в этих условиях.
Учитывая минорное значение каталазы в окислении этанола и ее значительную роль в обезвреживании перекиси водорода, такой эффект может также приводить к замедлению утилизации Н
2О2 и, тем самым, вносить определенный вклад в нарушение баланса между процессами свободно-радикального окисления и антиоксидантной защитой в гепатоцитах.
Интересно, что отмеченное через 2 часа после острого переохлаждения повышение активности ксантиноксидазы к суточному сроку сменяется ее снижением по сравнению с интактными животными. Если повышение активности этого фермента рассматривается как патогенетический механизм стресса [32], то наблюдаемое снижение можно трактовать как следствие активации стресс-лимитирующих систем. Вместе с тем, согласно полученным данным, алкоголь устраняет снижение активности ксантиноксидазы, тем самым нарушая указанный компенсаторно-приспособительный процесс.
Следует отметить и тот факт, что несмотря на тенденцию к повышению активности ксантиноксидазы при алкоголизации непосредственно после ПО (0.1>p>0.05, в сравнении с изолированным действием алкоголя) на этом сроке исследования не отмечается ни интолерантности к этанол-индуцированной гипотермии ни повышения острой летальной токсичности алкоголя. Это не позволяет высказаться в пользу значительной роли генерации активных форм кислорода при окислении ацетальдегида ксантиноксидазой в реализации токсического эффекта алкоголя при стрессе, связанном с переохлаждением.
Переохлаждение, как и ЭБС, приводит к дисбалансу между содержанием эстрадиола и тестостерона в плазме крови животных. Через 2 часа с момента завершения острого охлаждения обнаруживается падение уровня тестостерона (в 7.9 раза, p<0.001) и связанное с ним возрастание величины Э/Т-индекса (в 10.5 раза, p<0.001), которое сохраняется и в условиях алкогольной интоксикации этих животных. Однако, содержание тестостерона при
Таблица 6. Содержание и соотношение половых стероидов в плазме крови крыс, перенесших переохлаждение (ПО) и алкогольную интоксикацию
Группы животных
КОНТРОЛЬ
AЛКОГОЛЬ (А)
ПО - 2 часа
+ А
ПО - 24 часа
+ А
ЭСТРАДИОЛ (Э)
нг/л
36.64 ± 5.76 (n=15)
49.02 ± 5.84 (n=15)
28.48 ± 3.05 (n=8)
57.20 ± 8.57 (n=7)
55.10 ± 6.27 (n=6)
30.02 ± 4.47 (n=6) [^ ]
ТЕСТОСТЕРОН (Т)
мкг/л
3.40 ± 0.49 (n=15)
1.30 ± 0.18 (n=15) *
0.43 ± 0.08 (n=8) +
0.34 ± 0.06 (n=7)*[*]
4.15 ± 0.68 (n=6)
0.98 ± 0.12 (n=6) *
Э/Т-ИНДЕКС
х10 -2
1.24 ± 0.18 (n=15)
4.09 ± 0.51 (n=15) +
13.02 ± 3.87 (n=8) +
17.03 ± 0.69 (n=7)+[+]
1.57 ± 0.37 (n=6)
3.35 ± 0.55 (n=6)+
Примечание. см. табл. 3.
алкоголизации в условиях ПО в 3,9 раза ниже (p<0.01), а Э/Т-индекс имеет более высокое значение (в 4,2 раза, p<0.001), чем при изолированном воздействии алкоголя.
Через сутки после ПО содержание тестостерона и значение Э/Т-индекса уже не отличаются от показателей интактных животных. А на алкоголизацию крысы этой группы реагируют падением уровня тестостерона (в 3.5 раза, p<0.01) и ростом Э/Т-индекса (в 2.7 раза, p<0.001), что отмечалось и при интоксикации этанолом у интактных животных. Вместе с тем, при совместном воздействии изучаемых факторов отмечается более низкое содержание эстрадиола, чем при алкогольной интоксикации (61.2% p<0.02) и переохлаждении (54.5%, p<0.02) в отдельности.
Таким образом, гипоандрогенный эффект наблюдается лишь непосредственно после переохлаждения, а через сутки - соотношение между половыми стероидами нормализуется. Тем не менее, ответная реакция на алкоголь, проявляющаяся увеличением Э/Т-индекса, у перенесших ПО животных выражена на обоих сроках исследования, а при алкоголизации через 30 минут после переохлаждения - значительно усилена по отношению к не подвергавшимся гипотермии крысам.
При сравнении изменений содержания половых стероидов с изменениями активности ферментов катаболизма алкоголя выяснилось, что в динамике стресса (без последующей алкогольной интоксикации) наблюдается положительная корреляция между уровнем тестостерона и активностью АльДГ (r=0.556; p<0.05). Это приводит, соответственно, к корреляции между Э/Т-индексом и величиной соотношения АДГ/АльДГ (r=0.599, p<0.002). Но при алкогольной интоксикации после переохлаждения такие взаимосвязи не выявляются, что может отражать включение при алкогольной интоксикации иного, альтернативного, механизма регуляции активности основных ферментов катаболизма этанола, который в данном случае элиминирует влияние дисбаланса половых стероидов.
Рисунок 15. Особенности взаимосвязи между изменением величин АДГ/АльДГ-соотношения и Э/Т-индекса при раздельном и совместном действии ПО и алкоголя
Примечание. Данные представлены в истинных величинах показателей, пояснения в тексте.
В периоде после острого охлаждения регистрируется взаимосвязь между изменением значения Э/Т индекса и пероксидазной активностью каталазы (r=0.713; p<0.01), сохраняющаяся и при алкоголизации этих животных (r=0.636; p<0.05). Кроме того, в условия интоксикации этанолом у перенесших ПО крыс изменение Э/Т индекса коррелирует с активностью каталазы-Н
2О2 (r=0.785; p<0.01). Данные о повышении активности каталазы под влиянием эстрогенов [132] позволяют предположить, что обнаруженные сдвиги величины соотношения между эстрадиолом и тестостероном сказываются на активности этого энзима.